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酵母SC培養(yǎng)基主要由YNB(無氨基酸酵母氮基)和氨基酸混合物(DOSupplement)混合而成。它不含葡萄糖等任何一種碳源,但可根據(jù)試驗(yàn)需要添加葡萄糖、半乳糖、棉子糖、果糖、蔗糖等作為酵母的碳源。此外,培養(yǎng)基中還含有其他必需氨基酸、腺嘌呤和尿嘧啶等營(yíng)養(yǎng)成分。酵母SC培養(yǎng)基種類與應(yīng)用:種類:根據(jù)缺失的氨基酸種類不同,酵母SC培養(yǎng)基可分為一缺培養(yǎng)基、二缺培養(yǎng)基、三缺培養(yǎng)基、四缺培養(yǎng)基和五缺培養(yǎng)基等。應(yīng)用:一缺培養(yǎng)基:用于單質(zhì)粒酵母轉(zhuǎn)化篩選,如外源基因在酵母中的表達(dá)、異源基因功能...
使用無菌細(xì)胞培養(yǎng)皿進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)細(xì)致且關(guān)鍵的過程,需要嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作技術(shù)以避免污染。一、準(zhǔn)備工作無菌環(huán)境:確保實(shí)驗(yàn)臺(tái)、超凈工作臺(tái)或生物安全柜等無菌操作區(qū)域已經(jīng)過消毒處理,并保持清潔和干燥。個(gè)人防護(hù):穿戴無菌手套、口罩、帽子和實(shí)驗(yàn)服,以減少污染的可能性。材料準(zhǔn)備:準(zhǔn)備好無菌細(xì)胞培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、細(xì)胞懸液、移液器、吸管、離心管等所需材料和試劑。二、細(xì)胞培養(yǎng)皿的準(zhǔn)備選擇培養(yǎng)皿:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇合適的無菌細(xì)胞培養(yǎng)皿規(guī)格和材質(zhì)。培養(yǎng)基添加:在無菌條件下,將適量的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中,...
Westernblot,也稱Westernblotting、Western印跡,常簡(jiǎn)寫為WB,是用抗體檢測(cè)蛋白表達(dá)的重要方法之一。WB步驟操作如下:一、蛋白樣品處理1、裂解液的選擇根據(jù)蛋白在細(xì)胞中的位置選擇合適的裂解液,例如RIPA強(qiáng)(R1091)用于核蛋白及膜蛋白的提取、RIPA中(R1090)用于胞漿蛋白的提取、而RIPA弱或者western專用裂解液(W0013)適用于較好提取的蛋白;對(duì)于某些特定的亞細(xì)胞組份蛋白,例如細(xì)胞核蛋白、細(xì)胞漿蛋白、線粒體蛋白等,可以參考相關(guān)文...
【干貨分享】Western實(shí)驗(yàn)步驟及產(chǎn)品選擇Westernblot,也稱Westernblotting、Western印跡,常簡(jiǎn)寫為WB,是用抗體檢測(cè)蛋白表達(dá)的重要方法之一。WB步驟操作如下:一、收集蛋白樣品(Proteinsamplepreparation)1、裂解液的選擇根據(jù)蛋白在細(xì)胞中的位置選擇合適的裂解液,例如RIPA強(qiáng)(R1091)用于核蛋白及膜蛋白的提取、RIPA中(R1090)用于胞漿蛋白的提取、而RIPA弱或者western專用裂解液(W0013)適用于較好提...
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